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教你該如何使用土壤蔗糖酶測試盒

發表時間☁✘↟:2022-09-19  |  點選率☁✘↟:120
  土壤蔗糖酶(S-SC)能夠水解蔗糖變成相應的單糖而被機體吸收•▩│▩,其酶促作用產物與土壤中有機質☁☁↟、氮☁☁↟、磷含量•▩│▩,微生物數量及土壤呼吸強度密切關•▩│▩,是評價土壤肥力的重要指標•✘☁。
 
  土壤蔗糖酶測試盒測定原理☁✘↟:
 
  S-SC催化蔗糖降解產生還原糖•▩│▩,進一步與3•▩│▩,5-二硝基水楊酸反應•▩│▩,生成棕紅色氨基化合物•▩│▩,在510nm有特徵光吸收•▩│▩,在一定範圍內510nm光吸收增加速率與S-SC活性成正比•✘☁。
 
  操作步驟:
 
  本產品僅供科研研究使用•▩│▩,不得用於人體臨床直接檢測•✘☁。實驗開始前•▩│▩,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時•▩│▩,均需混勻•▩│▩,混勻時儘量避免起泡•✘☁。實驗前應預測樣品含量•▩│▩,如樣品濃度過高時•▩│▩,應對樣品進行稀釋•▩│▩,以使稀釋後的樣品符合試劑盒的檢測範圍•▩│▩,計算時再乘以相應的稀釋倍數•✘☁。
 
  1. 加樣☁✘↟:分別設空白孔☁☁↟、標準孔☁☁↟、待測樣品孔•✘☁。空白孔加樣品稀釋液100μl•▩│▩,餘孔分別加標準品或待測樣品100μl•▩│▩,注意不要有氣泡•▩│▩,加樣將樣品加於酶標板孔底部•▩│▩,儘量不觸及孔壁•▩│▩,輕輕晃動混勻•▩│▩,酶標板加上蓋或覆膜•▩│▩,37℃反應120分鐘•✘☁。為保證實驗結果有效性•▩│▩,每次實驗請使用新的標準品溶液•✘☁。
 
  2. 棄去液體•▩│▩,甩幹•▩│▩,不用洗滌•✘☁。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配製)•▩│▩,酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘•✘☁。
 
  3. 溫育60分鐘後•▩│▩,棄去孔內液體•▩│▩,甩幹•▩│▩,洗板3次•▩│▩,每次浸泡1-2分鐘•▩│▩,大約400μl/每孔•▩│▩,甩幹(也可輕拍將孔內液體拍幹)•✘☁。
 
  4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl•▩│▩,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘•✘☁。
 
  5. 溫育60分鐘後•▩│▩,棄去孔內液體•▩│▩,甩幹•▩│▩,洗板5次•▩│▩,每次浸泡1-2分鐘•▩│▩,350μl/每孔•▩│▩,甩幹(也可輕拍將孔內液體拍幹)•✘☁。
 
  6. 依序每孔加底物溶液90μl•▩│▩,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內•▩│▩,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色•▩│▩,後3-4孔梯度不明顯•▩│▩,即可終止)•✘☁。
 
  7. 依序每孔加終止溶液50μl•▩│▩,終止反應•▩│▩,此時藍色立轉黃色•✘☁。終止液的加入順序應儘量與底物液的加入順序相同•✘☁。為了保證實驗結果的準確性•▩│▩,底物反應時間到後應儘快加入終止液•✘☁。

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